荧光PCR冻干之二糖

二糖又名双糖, 双糖是碳水化合物的一种。它是由两个单糖分子经缩合反应除去一个水分子而成的糖。例如乳糖由葡萄糖和半乳糖组成，蔗糖由葡萄糖和果糖组成，麦芽糖由两个葡萄糖组成等。二糖作为常用的冻干保护剂，能够有效增加蛋白冻干稳定性，但是用它们作保护剂得到的无定形蛋白冻干固体具有较低的Tg，对储存过程中的高温和高湿条件耐受较差。大分子量糖能够增加冻干后固体的Tg，增加冻干后稳定性，但是对于低浓度蛋白活性保护作用不理想。例如蔗糖对蛋白质具有保护作用，葡聚糖在冷冻和干燥过程中不能防止蛋白质变性，而蔗糖与葡聚糖的混合物则大大提高了在冷冻干燥及储存过程中蛋白质的保护作用。尽管葡聚糖不能单独作为蛋白质的保护剂，但它具有高Tg，并能提高冻干蛋白质的储藏质量，因此和蔗糖等其它保护剂混合使用可以防止蛋白质的损伤，提高产品的质量。糖对蛋白质的保护作用的大小和其浓度有关，通常在某个浓度范围内，糖的保护作用随着浓度的升高而增大，达到某一浓度时，保护作用达到大值。这时在增大糖的浓度，保护作用不会明显增加，有时反而会降低。海藻糖作为荧光PCR冻干保护剂的其中一种，既能在冷冻过程中充当低温保护剂，又能在干燥脱水过程中起到脱水保护剂的作用。由冻干保护剂制备得到的荧光PCR冻干制剂可长期常温保存，且复溶速度快。